產品介紹
外泌體鑒定即外泌體表征,主要是為了證明分離獲得的細胞外囊泡是外泌體,具有外泌體的結構特征,粒徑特征和蛋白marker。MISEV2018提示了外泌體研究最基本的實驗,其中外泌體的表征主要分為兩部分:總體水平表征外泌體標志蛋白和單囊泡水平表征外泌體拓撲結構和粒徑;目前文章發表最常用的外泌體表征3項包括WB表征外泌體標志蛋白,電鏡表征外泌體形態特征和納米流式表征外泌體粒徑特征。
外泌體表征:電鏡
通過透射電子顯微鏡(TEM)觀察法在高倍放大下直接觀察單個外泌體的形態結構和大小,從而對外泌體的形態和大小進行鑒定;同時還可以根據背景的干凈程度評估外泌體的純度,是外泌體表征的金標準。
外泌體表征:粒徑分析
納米流式檢測技術(NanoFCM)是在細胞流式的基礎上開發的納米級流式技術,無需標記即可在單囊泡水平實現外泌體的直接檢測,可以檢測低至30 nm 的外泌體的散射光信號;熒光通道可以實現單個藻紅蛋白分子的檢測,并與背景完全區分開。通過數據分析可直接獲得外泌體的粒徑和濃度信息,同時可以檢測單個外泌體顆粒的內源性或外源標記的熒光信號。
外泌體鑒定:WB
WB是經典的研究蛋白表達的實驗手段?;谕饷隗w的生物學生成方式和前期研究,外泌體具有一些認可度高的的marker蛋白;通過比較混合細胞與外泌體的marker蛋白和陰性蛋白的表達差異,證實分離獲得的囊泡高表達外泌體marker蛋白。