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細(xì)胞培養(yǎng)&外泌體示蹤

Exosome Product Reagents

FluoExo^? 外泌體示蹤染色試劑盒-綠色

外泌體示蹤實(shí)驗(yàn)是一種用于追蹤外泌體在生物體內(nèi)或體外環(huán)境中的行為、分布和命運(yùn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，是外泌體功能機(jī)制研究以及工程化外泌體研究的必備實(shí)驗(yàn)。FluoExo^? 外泌體示蹤染色試劑盒，包含了示蹤所需的熒光染料、緩沖液和袖珍柱，能夠幫助用戶(hù)快速、高效、高質(zhì)量地完成外泌體熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。

概述: FluoExo^?外泌體示蹤染色試劑盒中的熒光染料，為帶有長(zhǎng)脂肪族碳尾的親脂性熒光染料，可以穩(wěn)定地整合到外泌體膜脂質(zhì)區(qū)并發(fā)出綠色熒光，其在體內(nèi)熒光半衰期為 10-12 天。本試劑盒中稀釋緩沖液是對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有等滲性，不含洗滌劑或有機(jī)溶劑，旨在于染料標(biāo)記步驟中維持外泌體活性，同時(shí)提高染料的溶解度和染色效率。袖珍柱用于以快速、有效去除外泌體標(biāo)記過(guò)程的游離熒光，獲得純化的熒光標(biāo)記外泌體，即可進(jìn)行外泌體示蹤研究。

規(guī)格

產(chǎn)品名稱(chēng)	貨號(hào)	規(guī)格	用途
FluoExo^?外泌體示蹤染色試劑盒-綠色	FE-01-01	1T	可進(jìn)行1次外泌體染色實(shí)驗(yàn)，單次最大處理100μl外泌體（建議外泌體濃度建議高于 1E+11 particles/ml或0.5-1μg/μl）
FluoExo^?外泌體示蹤染色試劑盒-綠色	FE-01-02	5T	可進(jìn)行5次外泌體染色實(shí)驗(yàn)，最多處理100μl*5=500μl外泌體（建議外泌體濃度建議高于 1E+11 particles/ml或0.5-1μg/μl）

應(yīng)用: 幫助用戶(hù)快速、高效、高質(zhì)量地完成外泌體熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行體內(nèi)、體外外泌體示蹤實(shí)驗(yàn)。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

1、操作便捷，僅需2次孵育+1次純化即可完成外泌體染色。

2、高效去除游離染料：試劑盒涵蓋了去除游離熒光染料的袖珍柱，游離染料去除效果好(>90-98%）。

以不同濃度染料（2μg/ml-200μg/ml）分別上樣100μl到袖珍柱中，收集流出液，酶標(biāo)儀檢測(cè)染料原液和流出液的熒光值，計(jì)算染料去除率，如上圖所示。可見(jiàn)，染料濃度在10μg/ml以上時(shí)，袖珍柱的游離染料去除率穩(wěn)定在98-99%以上。

3、外泌體回收率高：試劑盒涵蓋了去除游離熒光染料的袖珍柱，回收率高約50%左右。

分別使用5μg/ml和25μg/ml的親脂性熒光染料標(biāo)記293F外泌體（Cat# CTE-06）后，上樣100μl到Exosupur?袖珍柱，收集流出液，通過(guò)納米流式測(cè)定顆粒數(shù)，計(jì)算顆粒回收率，將袖珍柱再生后繼續(xù)重復(fù)幾次實(shí)驗(yàn)，如上圖所示。可見(jiàn)，不管使用低濃度還是中高濃度熒光染料標(biāo)記的外泌體，使用袖珍柱進(jìn)行幾次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，顆粒回收率相對(duì)較穩(wěn)定，約在50-60%以上。

請(qǐng)注意：濃度越低回收率越低，建議外泌體濃度高于 1E+11 particles/ml。

4. 外泌體染色效率高：染色后平均綠色熒光標(biāo)記陽(yáng)性率為77.38%。

使用本試劑盒標(biāo)記293F外泌體參考品（Cat# CTE-061）并使用袖珍柱純化，而后使用NanoFCM檢測(cè)外泌體標(biāo)記陽(yáng)性率，表明大于70%以上外泌體可被標(biāo)記，且外泌體陽(yáng)性率平均為77.38%。

應(yīng)用示例

按照試劑盒說(shuō)明書(shū)對(duì)貨架293F外泌體CTE-06進(jìn)行綠色熒光標(biāo)記，加入受體細(xì)胞中孵育24h（建議熒光標(biāo)記外泌體顆粒數(shù)與接種細(xì)胞比例大于5000：1），受體細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞核分別用紅色細(xì)胞膜染色劑和 Hoechst 標(biāo)記，激光共聚焦顯微鏡掃描結(jié)果表明：標(biāo)記的外泌體 (綠色) 被受體細(xì)胞攝取（其中空白組為不加外泌體組）。