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Exosupur? 細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒

Exosupur?細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒,基于自主專利開發(專利號:ZL201811302563.0),可對細胞上清、尿液、腦脊液等成分簡單的樣本進行快速、大通量外泌體分離純化,純化后的外泌體可以直接進行表征相關檢測以及細胞學和動物實驗。無需超高速離心設備,解決了傳統超速離心方法步驟繁瑣、依賴于超高速離心機設備、預約困難、耗時費力等難題。

概述

Exosupur?細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒,基于自主專利開發(專利號:ZL201811302563.0),可對細胞上清、尿液、腦脊液等成分簡單的樣本進行快速、大通量外泌體分離純化,純化后的外泌體可以直接進行表征相關檢測以及細胞學和動物實驗。無需超高速離心設備,解決了傳統超速離心方法步驟繁瑣、依賴于超高速離心機設備、預約困難、耗時費力等難題。

規格


    產品貨號規格應用
    Exosupur?細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒ESSO5050ml對50ml的細胞上清等大體積樣本進行快速外泌體分離純化
    ESSO500500ml對500ml的細胞上清等大體積樣本進行快速外泌體分離純化



應用

    本產品適合無血清培養的細胞上清,以及尿液、腦脊液、羊水等大體積樣本,即適合外泌體濃度比較低且成分比較簡單的樣本類型,進行快速外泌體分離純化。

    如本身外泌體濃度特別低想提高得率可先在上述處理后,先用100KDa超濾管對上清進行3-5倍濃縮,再進行后續步驟。


優勢

1、簡單高效:僅需提取、過柱純化,2步即可完成外泌體分離純化。

2、得率高,總顆粒數回收率高于60%-70%,蛋白去除率高于98%。



產品性能

    使用ESS050分離的無血清培養的293F細胞上清外泌體,進行電鏡觀測,結果如上所示。


常見問題

    1、如果細胞上清中添加了胎牛血清,還能使用本產品分離外泌體嗎?

    如果細胞上清中添加了高比例胎牛血清,如10% FBS,使用本產品無法有效去除其中富含的脂蛋白等雜質,需要結合超離、排阻色譜(Exosupur? ES9P11e/ES9P14e)等方法進一步除雜。

    使用ESS050分離的含10%常規FBS胎牛血清培養的癌細胞上清外泌體,進行電鏡觀測,如上所示,血清中雜質較多,因此不建議單獨使用本產品進行含血清體系外泌體的分離純化。

    2、樣本如何進行預處理?

    ①收集細胞上清,300g 4℃ 離心10min去除死細胞,3000g 4℃ 離心10min去除細胞碎片,10000g 4℃ 離心10min去除雜質碎片至無明顯沉淀,0.22μm微孔濾膜過濾。

    ②尿液充分渦旋1min后,先3000g離心10min去除沉渣上清進行0.22μm微孔濾膜過濾,濾出液濃縮后備用。

    本產品適合無血清培養的細胞上清、尿液、腦脊液、羊水等,外泌體濃度比較低且成分比較簡單的樣本類型,進行外泌體分離純化。

    如本身外泌體濃度極低想提高得率可先在上述處理后,先用100KDa超濾管對上清進行3-5倍濃縮,再進行后續步驟。 其他類型樣本預處理方法,請參考文獻或聯系我們。 

    3、  離心機離心力達不到10000g?

    建議離心力可以減少到6000g并4℃離心60min。時間的減少或者離心力的降低對于回收率有一定的影響,可以根據自己樣本情況,進行評估。

    4、加入A液和B液混勻后,4℃靜置孵育最長多久?

    建議12h起,但不建議超過24h。 

    5、  孵育過夜離心之后無沉淀,這個現象正常嗎?

     由于某些細胞上清外泌體含量比較低,加了A液和B液離心之后肉眼無法觀察到沉淀,建議:a.離心前根據離心后外泌體所在大致位置進行標記,以便后續棄去上清時減少損失。b.離心后在重懸時使用 PBS仔細吹打離心管壁四周和底部;提取后的外泌體應先進行 NTA/NanoFCM 顆粒濃度或 BCA 蛋白定量檢測,再決定是否進行后繼實驗。


說明書下載

ESSO50-Exosupur?細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒說明書.pdf

ESSO500-Exosupur?細胞上清2步法快速外泌體純化試劑盒說明書.pdf


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