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首頁 > 外泌體產品試劑 > ExoCCM? 無外泌體血清
無外泌體血清--解決不耐受無血清培養的細胞系外泌體研究難題

胎牛血清FBS是細胞培養中的常見添加劑,52%的ISEV受訪者使用含血清的培養基進行下游EV分析,其中59%和57%的受訪者分別進行了體外和體內功能研究。采用常規FBS進行細胞培養時,EV群體中將引入外源FBS來源EV和其他納米粒子(如蛋白質/生長因子聚集體、核酸),污染細胞來源的EV,從而混淆體外和體內分析,影響檢測結果的真實性。因此,恩澤康泰ExoCCM? 無外泌體血清—重磅上線,致力于解決不耐受無血清培養的細胞系外泌體研究難題。

概述

1)為什么使用無外泌體血清?

胎牛血清FBS是細胞培養中的常見添加劑,52%的ISEV受訪者使用含血清的培養基進行下游EV分析,其中59%和57%的受訪者分別進行了體外和體內功能研究。


FBS中富含有胎牛來源的細胞外囊泡EVs,其含量遠高于細胞所釋放的EVs。如果用常規FBS添加到培養基中,在EVs分離后,將得到包含來自培養細胞和添加了FBS條件培養基CCM來源的EV(以及可能的其他納米粒子)的混合物,且FBS來源的EVs蓋過了細胞來源EVs,從而混淆體外和體內分析,影響檢測結果的真實性和可靠性。

2)無外泌體血清真的完全沒有外泌體嗎?

您可能會好奇FBS中到底有多少EVs,去除后大概水平是多少?文獻中總結了一下數據,去除前一般FBS中至少含有2*10^10次方數量級的顆粒數,通過18小時超離或者過濾截留等方法,可以去除至少70%以上的顆粒,去除后平均水平約為5*10^10顆粒數。確實是沒有辦法完全去除外泌體,只能說盡量減少FBS EVs的殘留水平。這也提示我們有必要用添加了FBS的培養基提取EVs,作為對照處理細胞進行對比研究。


參考文獻:Foetal bovine serum influence on in vitro extracellular vesicle analyses. J Extracell Vesicles. 2021;10(3):e12061.


產品信息

貨號
規格產地
保存條件
試用裝
EDFBS5050ml新西蘭-20℃,有效期5年。4℃保存通常不宜超過1個月。貨號EDFBS5,規格5ml



產品優勢

本產品經過14項基本質控,確保產品質量:

a.       高安全性:確保內毒素、無菌、無支原體、無牛源病毒等安全性指標合格;


b.      低EVs顆粒殘留:


c.       不影響細胞正常生長:



產品使用建議

針對不耐受無血清培養的細胞系,又想開展外泌體研究:


1)直接替代常規FBS使用:

建議將常規完全培養基中的FBS替換為ExoCCMTM無外泌體血清(貨號EDFBS50),添加比例保持不變。注意:只替換血清,不要把培養基和其他成分也換了,需要控制變量進行比較。如果換成無外泌體血清后細胞生長較慢,可以適當增加無外泌體血清的添加比例。


2)先用常規FBS再替換無外泌體血清:

對于貼壁細胞匯合密度在70%以上,懸浮細胞培養到最大培養密度的60%-70%,用PBS洗滌細胞2-3遍以去除殘留的牛血清FBS,再添加含無外泌體血清(如EDFBS50)的培養基,繼續培養24小時或合適時間。(注意:只替換血清,不要直接把培養基和其他成分也換了。

引用文獻

1、Dual-Confined engineering boosts Cas12a efficiency for precise single exosome-based breast cancer diagnosis. Chemical Engineering Journal. Volume 517, 1 August 2025, 164318      IF=13.2    1區

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