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Exosome Product Reagents
Exosupur? 外泌體純化試劑盒，是專門用于從細胞上清、尿液、細菌培養上清等非復雜樣本中提取小細胞外囊泡sEV的純化試劑盒。試劑盒采用分子排阻色譜的原理，根據被分離樣本中組分的分子尺寸大小實現外泌體的分離。本試劑盒具有快速、高效、操作簡單、對設備要求低等特點，從上樣到餾分收集約30-60min內完成外泌體的分離純化。提取的外泌體產物質量穩定可靠、蛋白污染程度低，可用于蛋白提取分析、RNA提取分析、細胞功能檢測等下游生物學實驗。 針對中小體積到大體積細胞上清等成分簡單生物樣本sEV分離提供系統性解決方案。
關于外泌體純化方法，國際細胞外囊泡協會（ISEV）的最小實驗要求（MISEV2023）中根據不同的原理進行外泌體分離時，每種方法均有優缺點：
分離方法 | 優缺點 |
超速離心（DC） | l 常見的外泌體分離手段； l 但首先，需要特殊的大型超速離心儀器； l 其次，為提高得率，就需要更長的離心時間或者更大的離心力，但是這樣勢必會增加產物中雜蛋白（通常是密度跟EVs相近或更高的蛋白質）含量； l 再次，DC可能導致EVs的團聚或破損。此外，文獻報道的DC得率介于2-80%之間，可以想象不同的離心條件得到的產物其生化組成難以保持一致，穩定性較差； l 而且，超速離心機操作復雜（全過程大約需要3-9小時），通量有限，僅適合科研用途，難以滿足臨床應用的需求。 |
密度梯度離心（DGC） | l 能夠有效去除樣本中的雜蛋白，尤其適合對產物純度要求較高的應用。 l 但是，該方法操作非常復雜（全流程16-90小時不等），得率偏低（10%左右），通量嚴重受限，僅適合科研用途。 |
免疫捕獲（IC） | l 產物純度高； l 但是，依賴抗原表達，存在亞群的偏好性； l 另一方面，磁珠抗體價格昂貴，不適合處理大體積樣本； l 最后，在使用抗體磁珠處理血漿這類樣本時，試劑盒官方推薦先建議采用SEC試劑盒對樣本進行一個預純化，變相說明免疫捕獲法對于復雜樣本的直接處理能力并不理想。 |
聚合物沉淀（PEG） | l 操作簡單，成本低廉，產物EVs濃縮倍數可達50倍，而且對樣本體積幾乎沒有限制。 l 但是，選擇性偏低，產物存在大量的PEG分子和雜蛋白，珍貴的臨床樣本就不建議考慮這種分離方法。 |
超濾（UF） | l 能夠有效濃縮EVs，倍數可高達200倍以上。 l 一般僅作為一種濃縮手段配合其他方法使用。 |
分子尺寸排阻色譜法（SEC） | l 沒有剪切力等物理化學因素，保留EVs的完整性和生物活性，不會對EVs造成任何影響，粒徑均一，重復性好，而且操作簡單快捷，能夠有效去除樣本中粒徑較小的雜質顆粒； l 但是，產物濃度偏低，因此一般需配合超濾濃縮； l 而且，上樣體積受柱床體積限制，因此如果是大體積樣本可先濃縮再上樣。 |
分子尺寸排阻色譜法SEC在諸多分離方法中一騎絕塵，因其優良的性能脫穎而出，獲得廣大EVs領域專家的青睞，在EVs專刊JEV中的研究占比日益提高。
恩澤康泰開發的基于SEC原理的外泌體分離純化專利產品——Exosupur?試劑盒，自推出以來經受了市場和EVs領域專家的檢驗，在操作簡便性、性能、穩定性和性價比上獲得一致好評。
Exosupur?sEV分離kit-10ml排阻柱
規格：ES910【10ml*1pcs】
1）單次上樣10ml*5次重復=50ml
應用：適用于細胞上清、尿液等非復雜的大體積樣本。搭配ES8500細胞上清高倍濃縮試劑盒使用，總處理量高達1.5L-2.5L
Exosupur?sEV分離kit-1ml排阻柱
規格：ES911 & ES914
1）ES911【1ml*1pcs】，單次上樣1ml*5次重復=5ml
2）ES914【1ml*4pcs】，單次上樣1ml*4根*5次=20ml
應用：適用于非復雜細胞上清、尿液等濃縮后的小體積樣本sEV純化（5-20ml）
Exosupur?sEV分離kit-3ml排阻柱
規格：ES933
1）ES933【3ml*3pcs】，單次上樣3ml*3根*5次重復=45ml
應用：適用于非復雜細胞上清、尿液等濃縮后的45ml以內樣本sEV純化
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可兼容細胞上清、尿液等不同樣本類型；
可用于不同樣本的高通量測序、質譜等組學研究，以及下游的PCR、WB、WLISA驗證等，純度更高，雜質干擾更少，定量更準確；
可用于細胞、動物的功能機制研究，不影響外泌體性質和活性、不引入聚集和其他雜質等影響；
可用于工程化外泌體改造后再次純化等研究；
可用于純化相關的方法學開發中作為對照方法使用。
操作簡便：無需特殊設備，柱平衡、上樣、外泌體收集、外泌體濃縮四步操作，從上樣到分離完成僅需30-60min。升級后的產品配套柱平衡或清洗的適配器，讓操作更簡便，解放雙手；
性能優越：對于細胞上清樣本可回收最高達95%，雜蛋白去除率99%以上；
穩定性高：只回收固定尺寸范圍的外泌體，產物粒徑范圍窄；實驗受外界因素波動的影響比較小；不引入其他的物理化學因素，可以保持完整的外泌體形態和功能；
性價比高：可對排阻柱進行清洗再生，重復5次使用，可處理的樣本量大；
質量可靠：Exosupur?系列sEV純化試劑盒高效便捷，已輔助客戶發文100篇+，經受了行業專家的檢驗，獲得北京市新技術新產品認定。
Exosupur?分離的細胞上清小細胞外囊泡sEV TEM電鏡、WB和nanoFCM粒徑表征。
針對細胞上清樣本，Exosupur?最高可回收95%的外泌體，雜蛋白去除率99%以上。下左圖為1ml排阻柱(ES914、ES911)分離1mL濃縮細胞上清的效果，下右圖為3ml排阻柱(ES933)分離3mL濃縮細胞上清的效果，下第二排為10ml排阻柱上樣濃縮的10ml細胞上清的效果。高純度外泌體更有利于RNA組學、蛋白組學及細胞功能學和在體實驗研究。
Protein K和RNase A雙酶消化進一步證實了Exosupur?得到的RNA更多的是來源于囊泡，而囊泡外的游離RNA檢測值更低。
Exosupur?分離的外泌體進行蛋白質組研究時，可檢測到豐富的囊泡特異的標志物蛋白，表明外泌體純度高，可以更多檢測外泌體來源的蛋白；可檢測到比較多的蛋白數量，有利于不同樣本之間的差異分析；與已發表文章、數據庫具有較多overlap，表明數據可靠，能夠準確的對外泌體蛋白進行研究。
對比不同的SEC分離方法：經過Exosupur?試劑盒收集的餾分，具有最高的熒光強度（A)和最低的蛋白質濃度（B和C），表明Exosupur?具有最有效的EVs回收率和最低的游離蛋白質污染。
目前Exosupur?排阻試劑盒已經有100+ SCI文獻引用，可放心選購。
1、Li X, Cui J, Ding Z, et al. Klebsiella pneumoniae-derived extracellular vesicles impair endothelial function by inhibiting SIRT1. Cell Commun Signal. 2025;23(1):21. IF=8.9
文獻下載鏈接：https://biosignaling.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12964-024-02002-0
2、Wang C, Zhou X, Bu T, et al. Engineered extracellular vesicles as nanosponges for lysosomal degradation of PCSK9. Mol Ther. Published online November 26, 2024. doi:10.1016/j.ymthe.2024.11.034 IF=12.0
文獻下載鏈接：https://drive.weixin.qq.com/s?k=ADwAeQcoABA5icrKY4
3、Liu L, Chen S, Liang S, Liang Z. The expression profile of brain-derived exosomal miRNAs reveals the key molecules responsible for spontaneous motor function recovery in a rat model with permanent middle cerebral artery occlusion. Mamm Genome. 2024;35(3):362-376.
文獻下載鏈接：https://drive.weixin.qq.com/s?k=ADwAeQcoABASeS5Dil
4、Chen R, Kang Z, Li W, et al. Extracellular vesicle surface display of αPD-L1 and αCD3 antibodies via engineered late domain-based scaffold to activate T-cell anti-tumor immunity. J Extracell Vesicles. 2024;13(7):e12490. IF=14.5
文獻下載鏈接：https://isevjournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/jev2.12490
| 產品 | 規格 | 應用 | 說明書下載 |
| Exosupur?外泌體純化試劑盒 | ES911 | 適用于非復雜的細胞上清、尿液等樣本，單次上樣量1mL*1根*5次重復=5mL樣本量（濃縮后）。搭配Exosupur?細胞上清高倍濃縮試劑盒ES8500，可處理150-250mL原始上清。 | |
| Exosupur?外泌體純化試劑盒 | ES914 | 適用于非復雜的細胞上清、尿液等樣本，單次上樣量1mL*4根*5次重復=20mL樣本量（濃縮后）。搭配Exosupur?細胞上清高倍濃縮試劑盒ES8500，可處理高達600mL-1L原始上清。 | |
| Exosupur?外泌體純化試劑盒 | ES933 | 適用于非復雜的細胞上清、尿液等樣本，單次上樣量3mL*3根*5次重復=45mL樣本量（濃縮后）。搭配Exosupur?細胞上清高倍濃縮試劑盒ES8500，可處理高達1.35L-2.25L原始上清。 | |
| Exosupur?外泌體純化試劑盒 | ES910 | 適用于非復雜的細胞上清、尿液等樣本。單次上樣量10mL*5次重復=50mL樣本量（濃縮后）。搭配Exosupur?細胞上清高倍濃縮試劑盒ES8500，可一次性處理300mL-500mL，總處理量高達1.5L-2.5L |
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